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1. 总RNA提取与质检2. 已知序列的验证3. 合成5'和3' RACE-ready cDNA第一链；通过LD-PCR分别进行5' 和3' RACE4. 基因未知序列验证

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启动子序列缺失突变分析；转录因子的活性检测；信号通路的研究；药物筛选。

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实验动物的遗传质量对动物实验结果有重要影响。近交系小鼠是医学生物学研究中广泛应用的实验动物，其本身的质量尤其是个体基因的纯合性与不同个体遗传一致性对实验结果的可比性、可重复性和准确性起着决定性作用。

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临床意义：评估人体维生素D水平，用于疾病预测及诊断具体物质：25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3、3-epi-25羟维生素D3

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