T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成试剂盒
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| 大多数真核mRNA的高效翻译需要在5’末端有一个7-甲基鸟苷帽结构、3’末端有一个Poly(A)尾。T7 ARCA加帽加尾RNA合成试剂盒可以快速的体外合成带帽带尾的mRNA。T7 RNA聚合酶通过转录，将抗-反向帽类似物（ARCA）加到mRNA上。经DNase I短暂温育可以去除模板DNA，并在Poly(A)聚合酶的作用下，为加帽的mRNA加Poly(A)尾。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义RNA及RNAi实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和RNA疫苗等。 T7 RNA聚合酶识别T7 promoter（TTCTAATACGA CTCACTATAGG）以-2位G碱基为起点开始转录，该试剂盒可以从少量样本得到高效转录，单次反应可获得>30 μg的mRNA产物，转录长度可达4000nt以上。转录产物80%以上含有7-甲基鸟苷帽结构、Poly(A)尾长度>80nt。 |
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组份 |
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原理 |
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储存 |
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| -20℃可保存2年，避免反复冻融。 | ||||||||||||||||||||||||
实例 |
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| 以PCR产物作为模板进行体外转录获得的RNA，应用 T7 ARCA加帽加尾mRNA合成试剂盒进行加帽加尾，如图：泳道1为体外转录获得的RNA，泳道2为加帽加尾后产物。 |
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