RAPA3G Probe qPCR MasterMix (with UDG)
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| RAPA3G DNA聚合酶为第三代DNA聚合酶，该酶对dUTP具有极强的识别能力，在配合热敏UDG（该酶在95℃热变性5min后不可逆失活，不影响后续PCR反应）的条件下能达到最佳的防污染能力。RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG)是将化学修饰的热启动RAPA3G DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP、UDG等试剂组成的预混试剂，该制品中的dTTP核酸碱基完全被dUTP所取代，因此扩增产物均包含dUTP，在105 copies污染物的测试条件下，Ct可推迟15个以上（污染去除>99.997%），因此该RAPA3G Probe qPCR MasterMix具有极好的防核酸气溶胶污染性能。 RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG)是一种2×浓度的单组分预混试剂，用于探针法定量PCR。该制品不含有ROX校正染料，适用于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量PCR机型。此外，该制品在多重定量PCR （MultiPlex qPCR）检测表现出色，至少可进行4重的定量PCR检测。制品中的该酶经化学法修饰，在50℃以下100%无活性，只有95度条件下加热5min后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。 |
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组分 |
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主要特征 |
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应用 |
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| 基因分型、RNA转录的cDNA、基因组DNA、病毒DNA等定量检测。 | |||||||||||||||
储存 |
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| 请避光置于-20℃可保存３年。请避光置于-20℃以下可保存３年。该试剂经30次冻融后性能无下降，因此不使用时请置于-20℃避光保存。 | |||||||||||||||
反应实例 |
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| Fig1.首先使用含dUTP的RAPA3G Probe qPCR MasterMix扩增三种基因产物（GAPDH,EHP,Covid-19 N Gene），然后以105拷贝的含U产物作为模板,分别用RAPA3G Probe qPCR MasterMix（with UDG）和RAPA3G Probe qPCR MasterMix进行扩增，反应结束后统计两组之间的△Ct，结果为：这三个基因的△Ct值分别为15.3、17.1、16.2；△Ct值越大说明去除残留产物的效率越高，表明该RAPA3G Probe qPCR MasterMix（with UDG）具有良好的去除残留模板的能力。 | |||||||||||||||
A |
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B |
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C |
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D |
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E |
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| Fig2.四重引物、探针检测。分别以nCoV S基因质粒（蓝线- FAM通道）、nCoV N基因质粒（绿线- VIC通道）、nCoV ORF1ab基因质粒（红线- Cy5通道）和 人GAPDH内参Hela cDNA(黄线- ROX通道）为模板，四对引物和四条探针在同一体系内进行检测， 模板均使用10e8-100copy/Test(7个数量级)，A为四重检测扩增曲线和标准曲线，C-E为单独每一个通道的性能展示，结果可见该RAPA3G Probe qPCR Mix在7个数量级的动态检测中表现出卓越的扩增性能，各个通道之间区分良好。 | |||||||||||||||